儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

家兔骨髓間充質干細胞;2012083MSC 人主動脈血管平滑肌細胞，T/G HA-VSMC細胞 MPC-11細胞，小鼠漿細胞瘤波生坦(水合物)質量規(guī)格：≥98.5%（HPLC）,BR,一水合物Bosentan hydrate

人胚肺成纖維細胞;MRC-5波生坦水合(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Bosentan hydrate

HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/Swine/Oario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) 質量規(guī)格：>99.0%;P/神經(jīng)激肽受體拮抗劑Fosaprepitant dimeglumine

CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2β-硫丹(標準品)質量規(guī)格：分析標準品β-Endosulfan

TGM2 Others Human 人 TGM2 / ansglutaminase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫丹醇(標準品)質量規(guī)格：分析標準品Endosulfan alcohol
MA, 小鼠星形膠質細胞L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽L-Glutamic acid diethyl ester 質量規(guī)格：0.97

RDFs, 大鼠成纖維細胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細胞 CGM1(EB病毒轉化的B細胞)L-絲氨酸(標準品)L-Serine質量規(guī)格：>99%,標準品

人口腔表皮樣癌細胞;KBL-精氨酸(標準品）L-Arginine質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細胞裂解液 (陽性對照) L-精氨酸L-Arginine質量規(guī)格：≥98%,BR

人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10L-精氨酸鹽酸鹽L-Arginine 質量規(guī)格：>99%,BR
MADB106(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×24,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one

Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 內皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))質量規(guī)格：>95.0%(HPLC)4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one

人牙齦成纖維細胞HGF3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)3,3'-Bithiophene

CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))質量規(guī)格：>99.0%(GC)2,1,3-Benzothiadiazole

盤羊皮膚細胞;ASHS34,5-去亞異丙基托吡酯質量規(guī)格：美國進口4,5-Desisopropylidene Topiramate
VASP Phospho-Ser239 AntibodySK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞硝酸鈀Palladium (II) nitrate dihydrate質量規(guī)格：BR

人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL鈀粉(>99%,BR)Palladium, powder質量規(guī)格：>99%,BR

M1 小鼠白血病細胞乙酸副品紅(>85%,BS)Pararosaniline acetate質量規(guī)格：>85%,BS

KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉Paxilline*, from Penicillium paxilli質量規(guī)格：>98%,BC

小鼠前胃癌細胞;MFC青霉酸(>98% (HPLC),BC)Penicillic acid質量規(guī)格：>98% (HPLC),BC

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